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应用rna干扰技术阻断前列腺癌细胞中src1基因的表达及意义.docx


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文档介绍:
目 录
英文缩略词 1
中文摘要 3
英文摘要 5
前言 7
实验材料 9
实验方法 12
实验结果 20
讨论.。....。。. ...... 28 结.i}台.. .。..。.。. .. .。... ...。.. ..3l 参考文献 32
致谢。.... .. .. ... .. ... 34 论文综述 35
独创性声明.: . 。 43
温州医学院硕士学位论文
缩略词表(按字母顺序)
缩写词 英文全称 中文全称
№ 雄激素剥脱疗法
ADPC androgen-dependent prosatate cancor 雄激素依赖性前列腺癌
AdT 去势手术
AIPC androgen-independent prostate canc盯 雄激素非依赖性前列腺癌
AR 雄激素受体
Arcy/bis-arcy Arty lamide bis arty lamide 丙烯酰***.双丙烯酰***
CCK.8 Cell Counting Kit一8 Assay 细胞活性计数试剂盒
CG砒 Cell growth inhibition rate 细胞生长抑制率
DMSO Dimethyl suffate 二***亚砜
ED吼6L ethylene diamine tetraacetic acid 乙二***四乙酸
FBS Fctal Bovine Serum 胎牛血清
NR Nuclear receptor 核受体
OD Optical density 光密度
PAGE polyac黟lamido gel electrophoresis 聚丙烯酰***凝胶电泳
PBS Phosphate buffer saline 磷酸盐缓冲液
Pea 前列腺癌
PI Propidium Iodide 碘化丙啶
PMSF phenylmethylsulfonyl fluoride 苯甲磺酰***化物
PVDF Polyvinylidene Fluoride 二***化树脂
Rpm Revolution per mmute 每分钟转数
温州医学院硕士学位论文
缩写词
RNAi
英文全称
RNA interference
中文全称
RNA干扰
SDS
Sodiumdod臼yl sulfate
十二炕基磺酸纳
siRNA
Small interference RNA
小干扰RNA
SRC-l
Steroid &∞eptor CoactivaωIr-l
类固醇受体共激活分子 1
TBS TEMED
Tris buffer saline Te位amethylethylenediamine
Tris 缓冲液四***乙二眩
-2-
温州医学院硕士学位论文
中文摘要
目的:利用RNA干扰技术,根据类固醇受体共激活分子(SRC.1)的碱基序列设计可与之相作用的siRNA,并转染前列腺癌细胞系PC3和LNCap,通过RN^ 干扰(RNAi)阻断细胞中SRC-I的表达,并研究SRC-I基因沉默后对前列腺癌细胞生长及侵袭性的影响。
方法:用脂质体法将siRNA转染处于对数期生长的前列腺癌细胞PC3细胞系和LNCap细胞系,通过Q-PCR检测转染后SRC-ImRNA变化及用蛋白免疫印迹检测 SRC-I蛋白的表达变化,K-8法检测转染后不同分组细胞生长情况的变化, 用transwell小室检测转染后不同组PC3细胞的体外侵袭力。
结果:转染sRC-lsiRNA24小时后的前列腺癌LNCap细胞系中SRC-ImRNA的量与空白对照组相比较下降了约35%,转染48小时后下降了约77%,差异具有统计学意义(p<0.05)。在PC3细胞系中转染24d'时后SRC-ImRNA的相对表达量下降了约42%, 48d,时后下降了约79%,差异具有统计学意义(p<O.05);转染24-48d、时后LNCap 细胞SRC-I蛋白的表达量(24h 0.359114).034 48h 0.2574士0.065)与阴性对照组(24h 0.7816士0.078 48h 0.7658士0.043)、转染试剂组(24h 0.8398士0.013 48h 0.7857士0.051)和空白对照组(24h 0.816110.065 48h 0.8045士0.107)相比较明显减少(pC0.05)。转染24-48d、时后PC3细胞SRC-1蛋白的表达量(24h 0.5536士0.071 48h 0.3419士0.025)与阴性对照组(24h 0.8562士0.092 48h
0.8791+0.076)、转染试剂组(24h 0.7992+0.072 48h 0.9731士0.051)和空白对照组(24h 内容来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.
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